Mėginio paruošimas irĮkeliama
Kadangi daugeliu atvejų naudojama nuolatinė buferinė sistema be gelio, mėginiai turi būti tinkamos koncentracijos ir mažo tūrio. Naudokite apipetelėtai įpilkite mėginio, 5–10 μg į duobutę, kad būtų išvengta reikšmingo skiriamosios gebos sumažėjimo. Kadapakrovimo pavyzdys, maitinimas turi būti išjungtas. Mėginyje turi būti indikatorinių dažų (0,025 % bromfenolio mėlynos arba oranžinės spalvos) ir sacharozės (10-15 %) arba glicerolio (5-10 %), kad padidėtų jo tankis, sukoncentruotų mėginį ir būtų išvengta difuzijos. Tačiau kartais sacharozė arba glicerolis elektroforezės rezultatuose gali sukelti U formos juosteles, kurių galima išvengti naudojant 2,5 % Ficoll (polivinilpirolidono).
Elektroforezė
Elektroforezės įtampa yra 5-15 V/cm, paprastai apie 10 V/cm. Didelių molekulių atskyrimui įtampa turėtų būti mažesnė, dažniausiai ne didesnė kaip 5 V/cm.
Dažymas
Fluorescencinis dažiklis etidžio bromidas (EB) dažniausiai naudojamas dažymui, siekiant stebėti DNR juostas agarozės gelyje. EB gali įsiterpti tarp DNR molekulių bazinių porų, todėl EB jungiasi su DNR. 260 nm ultravioletinės šviesos sugertis DNR perduodama į EB, o surištas EB spinduliuoja fluorescenciją ties 590 nm raudonai oranžinėje matomos šviesos spektro srityje. Gelio dažymas 1 mmol/L MgSO4 tirpale 1 valandą gali sumažinti fono fluorescenciją, kurią sukelia nesurištas EB, todėl lengviau aptikti mažus DNR kiekius.
EB dažai turi keletą privalumų: juos paprasta naudoti, neskaido nukleorūgščių, pasižymi dideliu jautrumu, gali nudažyti tiek DNR, tiek RNR. EB bet kuriuo metu galima pridėti prie mėginio ir sekti naudojant UV absorbciją. Po dažymo EB galima pašalinti ekstrahuojant n-butanoliu.
Tačiau EB dažai yra stiprus mutagenas, todėl juos tvarkant reikia imtis atsargumo priemonių, pvz., mūvėti polietilenines pirštines. Akridino apelsinas taip pat dažnai naudojamas dažiklis, nes jis gali atskirti vienagrandės ir dvigrandės nukleino rūgštis (DNR, RNR). Dvigrandėms nukleino rūgštims būdinga žalia fluorescencija (530 nm), o viengrandžių nukleino rūgščių – raudona fluorescencija (640 nm). Be to, dažymui galima naudoti kitus dažus, tokius kaip metileno mėlynasis, metileno žalias ir chinolinas B.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) daugiau nei 50 metų specializuojasi elektroforezės prietaisų gamyboje su savo profesionalia technine komanda ir MTEP centru. Turime patikimą ir išbaigtą gamybos liniją nuo projektavimo iki patikrinimo ir sandėlį bei rinkodaros pagalbą. Mūsų pagrindiniai produktai yra elektroforezės elementas (bakas / kamera), elektroforezės maitinimo šaltinis, mėlynas LED šviestuvas, UV peršvietimas, gelio vaizdo ir analizės sistema ir kt.
Dabar ieškome partnerių, laukiame tiek OEM elektroforezės bako, tiek platintojų.
Jei turite kokių nors mūsų produktų pirkimo planų, nedvejodami susisiekite su mumis. Galite atsiųsti mums žinutę el[apsaugotas el. paštas]arba[apsaugotas el. paštas], arba skambinkite mums +86 15810650221 arba pridėkite Whatsapp +86 15810650221 arba Wechat: 15810650221.
Nuskaitykite QR kodą, kad pridėtumėte „Whatsapp“ arba „WeChat“.
Paskelbimo laikas: 2023-12-20