Agarozės gelio paruošimas elektroforezei

Agarozės gelio paruošimas elektroforezei

Pastaba: visada mūvėkite vienkartines pirštines!

Žingsnis po žingsnio instrukcijos

Agarozės miltelių svėrimas:užiūrėkite svėrimo popierių ir elektronines svarstykles 0,3 g agarozės miltelių matavimui (pagal 30 ml sistemą).

TBST buferio paruošimas:p100 ml Erlenmejerio kolboje paruoškite 30 ml 1x TBST buferio.

Agarozės miltelių tirpinimas:psupilkite agarozės miltelius į TBST buferį ir gerai suplakite.Įdėkite juosį mikrobangų krosnelę ir kaitinkite (paprastai 50 sekundžių, uždengus aliuminio folija), kol visiškai ištirps.

Aušinimas ir nukleazės pridėjimas:upirštinėmis išimkite mišinį iš mikrobangų krosnelės ir leiskite jam šiek tiek atvėsti šaltame vandenyje, kol sušils (apie 60°C). Įpilkite 2 µl nukleazės (Eb pakaitalo) maišydami, kad gerai susimaišytų.

Gelio formos paruošimas:

• Cliesos ir išdžiovinkitegelio padėklas ir gelio liejimo įrenginyselektroforezės bako.
•  Pnėriniuoti gelįpadėklasį vidinį baką ir įkiškite šukas į fiksuotą padėtį.
• Sumaišykite iki maždaug 65 °C atšaldytą agarozės gelio tirpalą ir atsargiai supilkite jį antgelio padėklasesančiamegelio liejimo prietaisas, lėtai paskleiskite, kol ant stiklo plokštės susidarys lygus gelio sluoksnis.
• Leiskite stovėti kambario temperatūroje, kol gelis visiškai sukietės.
• Atsargiai nuimkite šukas vertikaliai ir nuimkite juostelę.
• Padėkite gelįpadėklasį elektroforezės baką.

Svarbu: įsitikinkite, kad šukos dantų srityje nėra oro burbuliukų. Skysčio paviršius turi būti lygus, be bangelių.

Gelio paleidimas

Gelio įkėlimas

Geliui sukietėjus, įdėkite jį į elektroforezės baką ir pilkite elektroforezės buferį, kol gelis panirs.

Mėginių ruošimas

• Iš šaldytuvo paimkite žymeklį ir įkrovimo buferį.
• Į mėginius įpilkite 6 µl įkrovimo buferio ir gerai išmaišykite.
• Mikropipete lėtai įdėkite mėginius į dideles gelio duobutes (būkite atsargūs, kad nepradurtumėte gelio ir neišleiskite viso tūrio, kad nesusidarytų oro burbuliukų).
• Įdėkite žymeklį į bet kurį mažą šulinį (atminkite jo padėtį).

Elektroforezės pradžia

• Uždenkite elektroforezės baką ir pradėkite elektroforezę iškart po gelio įdėjimo.
• Nustatykite įtampą 60-100 V. Mėginiai migruos iš neigiamo elektrodo (juodo) į teigiamą elektrodą (raudoną).
• Didesnė įtampa sutrumpina efektyvų agarozės gelio atskyrimo diapazoną.
• Nutraukite elektroforezę, kai bromfenolio mėlynasis dažiklis pasiekia maždaug 1 cm nuo apatinio gelio plokštelės krašto.

Rezultatų stebėjimas

Atskyrę juostas, nutraukite elektroforezę, išimkite gelį ir tiesiogiai jį aptikkite ir nufotografuokite.

Naudokite gelio vaizdavimo sistemą, kad nufotografuotumėte ir stebėtumėte juosteles (patikrinkite, ar yra žymeklio ar mėginių juostelių).

Gavę gelio juostos žemėlapį, raskite žymeklį. Pagal žymeklį galite nustatyti tikslines juostas!

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) elektroforezės gaminius gamina daugiau nei 50 metų. Čia pristatome savo horizontaliąsias elektroforezės sistemasagarozės geliselektroforezė.Pasirinkitehorizontalios elektroforezės sistemosiš Pekino liuyi už jūsų gelio elektroforezės eksperimentą, kuris padės jūsų moksliniams tyrimams biotechnologijų pramonėje.

Siūlome įvairių modelių horizontalias elektroforezės talpyklas, skirtas lieti ir važiuoti mažomisagarozėsgeliai iki dideliųagarozėsgeliai

Horizontalaus panardinamo gelio elektroforezės įrenginio pasirinkimo vadovas

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) daugiau nei 50 metų specializuojasi elektroforezės prietaisų gamyboje su savo profesionalia technine komanda ir MTEP centru. Turime patikimą ir išbaigtą gamybos liniją nuo projektavimo iki patikrinimo ir sandėlį bei rinkodaros pagalbą. Mūsų pagrindiniai produktai yra elektroforezės elementas (bakas / kamera), elektroforezės maitinimo šaltinis, mėlynas LED peršvietimas, UV transiliuminatorius, gelio vaizdo ir analizės sistema ir tt Mes taip pat tiekiame laboratorinius instrumentus, tokius kaip PGR prietaisas, sūkurinis maišytuvas ir centrifuga laboratorijai.

Jei turite kokių nors mūsų produktų pirkimo planų, nedvejodami susisiekite su mumis. Galite atsiųsti mums žinutę el[apsaugotas el. paštas]arba[apsaugotas el. paštas], arba skambinkite mums +86 15810650221 arba pridėkite Whatsapp +86 15810650221 arba Wechat: 15810650221.

Nuskaitykite QR kodą, kad pridėtumėte „Whatsapp“ arba „WeChat“.