Gelio elektroforezė yra vienas iš pagrindinių metodų, naudojamų molekulinėje biologijoje DNR analizei.Šis metodas apima DNR fragmentų migraciją per gelį, kur jie atskiriami pagal dydį arba formą.Tačiau ar kada nors susidūrėte su kokiomis nors klaidomis atlikdami elektroforezės eksperimentus, pavyzdžiui, ant agarozės gelio išsitepėte juostelių arba ant gelio nebuvo juostelių?Kokia gali būti šių klaidų priežastis?
Mūsų technikai čia apibendrino keletą trikčių šalinimo būdų, kad galėtumėte sužinoti.
1. Ant agarozės gelio išteptos juostelės
●DNR buvo suardyta.Venkite užteršimo nukleaze.
● Elektroforezės buferis nėra šviežias.Pakartotinai panaudojus elektroforezės buferį, jonų stiprumas mažėja, padidėja jo pH vertė, todėl silpnėja buferio talpa, o tai turi įtakos elektroforezės efektui.Rekomenduojama dažnai keisti elektroforezės buferį.
● Taikytos netinkamos elektroforezės sąlygos.Neleiskite įtampai viršyti 20 V/cm, o elektroforezės metu palaikykite <30°C temperatūrą.Milžiniškos DNR grandinės elektroforezei temperatūra turi būti <15°C. Patikrinkite, ar elektroforezės buferyje yra pakankamai buferio talpos.
● Ant gelio buvo įdėta per daug DNR.Sumažinkite DNR kiekį.
● Per daug druskos DNR.Naudokite etanolio nusodinimą, kad pašalintumėte druskų perteklių.
● DNR buvo užteršta baltymu.Naudokite fenolio ekstraktus, kad pašalintumėte baltymus.
● DNR buvo denatūruota.Prieš elektroforezę nešildykite.Praskieskite DNR buferyje su 20 mM NaCl.
2. DNR juostų migracijos anomalijos
● λHind III fragmento COS vietos renatūravimas.Prieš elektroforezę 5 minutes kaitinkite DNR 65 °C temperatūroje, tada 5 minutes vėsinkite ant ledo bloko.
● Taikytos netinkamos elektroforezės sąlygos.Neleiskite įtampai viršyti 20 V/cm, o elektroforezės metu palaikykite <30°C temperatūrą.Patikrinkite, ar elektroforezės buferyje yra pakankamai buferio talpos.
● DNR buvo denatūruota.Prieš elektroforezę nešildykite.Praskieskite DNR buferyje su 20 mM NaCl.
3. Silpnos DNR juostos arba jų nėra ant agarozės gelio
● Ant gelio buvo įdėtas nepakankamas DNR kiekis arba koncentracija.Padidinkite DNR kiekį.Poliakrilamido gelio elektroforezė yra šiek tiek jautresnė nei agarozės elektroforezė, todėl mėginio įkrovą galima atitinkamai sumažinti.
● DNR buvo suardyta.Venkite užteršimo nukleaze.
● DNR buvo atlikta elektrofore nuo gelio.Elektroforuokite gelį trumpiau, naudokite mažesnę įtampą arba naudokite didesnio procento gelį.
● Etidžio bromidu nudažytos DNR vizualizavimui buvo naudojamas netinkamas W šviesos šaltinis.Norėdami padidinti jautrumą, naudokite trumpojo bangos ilgio (254 nm) W šviesą.
4. Trūksta DNR juostų
●Mažo dydžio DNR elektroforezė buvo pašalinta iš gelio.Elektroforuokite gelį trumpiau, naudokite mažesnę įtampą arba naudokite didesnio procento gelį.
● Sunku atskirti panašios molekulinės DNR juostas.Padidinkite elektroforezės laiką ir patikrinkite koncentracijągelio, kad įsitikintumėte, jog gelio procentas turi būti panaudotas teisingai.
● DNR buvo denatūruota.Prieš elektroforezę nešildykite.Praskieskite DNR buferyje su 20 mM NaCl.
● DNR grandinės yra didžiulės, todėl įprastinė gelio elektroforezė netinka.Impulsinės gelio elektroforezės analizė.Kokių dar problemų turėjote naudojant agarozės gelio elektroforezę?Ateityje ieškosime daugiau vadovų.
„Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd“ („Liuyi Biotech“) yra specializuota įmonė, kuri daugiausia dėmesio skiria su elektroforeze susijusiems produktams Kinijoje.Jos istorija prasideda 1970 m., kai Kinija dar nebuvo pradėjusi reformuoti ir atverti laiko.Daugelį metų plėtojant, Liuyi Bitotech turi savo prekės ženklą, kuris vietinėje elektroforezės produktų rinkoje žinomas kaip Liuyi prekės ženklas.
Prekės ženklas „Liuyi“ turi daugiau nei 50 metų istoriją Kinijoje ir įmonė gali tiekti stabilius ir aukštos kokybės produktus visame pasaulyje.Ilgus metus tobulėjant, jis vertas jūsų pasirinkimo!
Liuyi Biotech horizontalios elektroforezės ląstelės (cisternos/kameros) yra aukštos kokybės ir geros išvaizdos.Įvairių dydžių gelio padėklai gali atitikti skirtingus jūsų eksperimentinius reikalavimus.Mes turime savo techninę komandą ir gamyklą.Nuo projektavimo iki gamybos, žaliavų iki pagrindinių dalių – galime kontroliuoti visą procesą.DYCP 31 serija skirta DNR elektroforezei, kuri yra modelisDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, irDYCP-31E.Skirtumai tarp jų yra gelio dydžiai ir kaina.Savo klientams siūlome visų dydžių gaminius.ModelisDYCP-32Cgali pagaminti didžiausią gelį 250mm * 250mm.
Tuo tarpu mes rekomenduojame mūsų elektroforezės maitinimo šaltinįDYY-6C,DYY-6DirDYY-10Cmūsų elektroforezės elementams (cisternoms/kameroms) DYCP-31 ir 32 serijoms.
Jei norite gauti daugiau informacijos apie produktus, apsilankykite šioje svetainėje, kad gautumėte daugiau, ir susisiekite su mumis el. paštu ir praneškite mums, ko norite, ir sužinokite, ar galime jums pasiūlyti sprendimus.
Norėdami gauti daugiau informacijos apie mus, susisiekite su mumis el[apsaugotas el. paštas], [apsaugotas el. paštas].
Paskelbimo laikas: 2022-09-09